DNA建庫方法大致可分為這幾種類型
更新時(shí)間：2022-02-21 點(diǎn)擊次數(shù)：3915
DNA分子的功能是貯存決定物種性狀的幾乎所有蛋白質(zhì)和RNA分子的全部遺傳信息，對(duì)DNA信息的解讀，對(duì)于我們研究生命的奧秘、疾病的機(jī)理等有著重要的意義。DNA類的文庫主要分為：DNA小片段文庫、DNA大片段文庫、Exon文庫、PCR-Free文庫和單細(xì)胞文庫等。DNA建庫方法是分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)原理，其本質(zhì)就是在待測(cè)片段兩端加上接頭的過程。
DNA小片段文庫是指片段大小在1kb以下的普通DNA文庫（200bp、350bp、500bp等），DNA小片段文庫可用來進(jìn)行人重測(cè)序，動(dòng)植物、微生物的de novo和重測(cè)序，16s rRNA測(cè)序，宏基因組測(cè)序等項(xiàng)目類型的文庫構(gòu)建。
DNA大片段文庫，又稱之為末端配對(duì)（mate-paired）文庫，片段長(zhǎng)度大于1kb，主要用于動(dòng)植物，微生物的de novo測(cè)序。
PCR-Free文庫，顧名思義，就是在文庫構(gòu)建過程中不需要進(jìn)行PCR的文庫。主要是針對(duì)一些特殊樣本，比如GC含量高、PCR擴(kuò)增困難的樣本和PCR產(chǎn)物。不足之處在于所需的樣本起始量較少。
Exon文庫：人類外顯子組總共約30 Mb，占人類基因組約1%，外顯子具有高度的保守型，且大部分疾病的致病位點(diǎn)位于外顯子區(qū)。外顯子測(cè)序是指利用序列捕獲技術(shù)將外顯子區(qū)域DNA捕捉并富集后進(jìn)行高通量測(cè)序的基因組分析方法。Exon文庫主要用于人全外顯子測(cè)序和目標(biāo)區(qū)域測(cè)序。
單細(xì)胞DNA文庫：隨著二代測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，把一次實(shí)驗(yàn)測(cè)許多條DNA序列的這個(gè)難題解決之后，一次把一個(gè)人的全基因組給測(cè)出來，最極限的情況，就是樣本量少到一個(gè)細(xì)胞，就可以測(cè)出整個(gè)基因組的序列信息。
目前DNA建庫方法按照接頭連接方式不同可分為五類：
1、PCR擴(kuò)增子建庫；
2、Swift法建庫；
3、轉(zhuǎn)座酶法建庫；
4、TA克隆連接接頭建庫；
5、平末端連接接頭建庫。
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